原代细胞培养是直接从体内提取细胞、组织和器官后即刻进行的培养。严格来说，这种培养是在细胞成功传代之前进行的，期间细胞保持其原有的基本特性，正常细胞仍然具备二倍体数。原代细胞能够真实反映特定细胞在体内的生理状态，然而它们通常只能够传代少数几代，随后便会停止增殖或死亡。在一些需要大量细胞的实验中，如生化分解和遗传筛选等，原代细胞的使用受到限制。因此，在体外建立永生细胞对于研究细胞的生长、分化和衰老至关重要。本文将简要介绍EVO视讯如何将原代培养发展为永生细胞系的方法。

我们的研究提供了三种方案供您选择：

方案一：SV40 Large T介导的永生化细胞

许多病毒基因具有影响细胞周期的特性，其中最常用的是SV40大T抗原，用于诱导细胞的永生化。SV40（猿猴肾细胞病毒）编码大T抗原和小T抗原。这些抗原在细胞转化中起着重要作用：大T抗原是转化的必需成分，且其持续表达对于维持转化细胞的表型至关重要；小T抗原虽然不是必要的，但可增强转化效果。因此，SV40 Large T能够使细胞进入永生化增殖状态，然而，其潜在的致癌风险可能导致细胞的恶性转化。

方案二：hTERT介导的永生化细胞

端粒中包含一种逆转录酶（TERT），能够催化端粒DNA的合成并不断延长端粒，从而使细胞持续生长。正常细胞中通常不表达TERT，为了促使细胞永生化，需要使用转基因技术将TERT转染到细胞中。通过转染人端粒酶逆转录酶cDNA（hTERT），可以有效激活端粒酶活性，维持端粒长度，防止染色体端粒的降解，并诱导细胞永生化。在高传代数和使用致癌基因的情况下，hTERT永生化细胞可以真实代表体内正常细胞的生理特性。

方案三：复合型病毒感染介导的永生化细胞

在某些细胞类型中，单一永生化方法可能不够效果，或者某些细胞不适合使用端粒酶介导的方法。因此，为了适应不同细胞系，结合抑制细胞周期和hTERT表达的复合型病毒感染方法是最佳选择。这种方法通过慢病毒转染携带SV40T和hTERT基因，融合了两种方法的优势，既保持了细胞的原始特性，也降低了核型发生变异的风险。

除了以上方法，基因编辑、化学诱导及物理方法（如穿刺细胞）等技术也是获得永生化细胞的重要手段。EVO视讯致力于通过慢病毒转染单独或混合携带SV40T和hTERT基因，来实现原代细胞的永生化，并提供广泛的人源及动物源永生化细胞株，以及多种永生化细胞培养基供科研人员选择。

永生化细胞的应用领域

EVO视讯的永生化细胞广泛用于药物筛选和开发，成为药物有效性和安全性的理想模型，并帮助科学家在基因功能和细胞信号通路方面进行重要研究。此外，癌症研究也是永生化细胞的重要领域，这些细胞系源自癌细胞，促进了癌症发生、发展及治疗机制的理解。同时，永生化细胞如CHO细胞被广泛用于单克隆抗体和重组蛋白的生产，助力生物药物的开发。